是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 07:58:01
是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf

是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf
是做基因克隆还是pcr产物直接测序?
我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf是从99bp-1700bp,pcr测序结果在216bp之后的序列是多次pcr产物测序结果一致并且与转录组测序结果也一致,是包含polyA结构的.又已经设计了从1bp-500bp的引物企图扩增,但未得到产物.现在是在考虑要不要做5‘端race克隆得到包括ATG的99-216bp处的序列或者别的什么快速简单的方法能得到完整orf?是来做硕士毕业论文

是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf
看来你的植物材料没有基因组数据啊,这样的话5’-RACE是必需的,两头序列有了以后,直接设计引物从基因组DNA扩增以及从cDNA中扩增,找到内含子

是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf 为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con PCR产物测序问题用PCR产物直接测序,PCR产物是1200bp左右,但是测出来只有1000bp,请问为什么少了这么多序列呢,我是新手,刚开始做,很多不懂得,望请指教, PCR产物直接测序的原理 从NCBI上查找到的一个目的基因做PCR,设计引物时PCR产物长度是这个基因的全部序列吗?CAGTCTAATGATTACCGTCCTTCATACCACTTCACACCGGACCAGTACTGGATGAACGAGCCAAACGGCCTGATTAAAATCGGATCCACCTGGCACCTGTTCTTTCAACACAATCCGACGGCCAATGTATGGGGCAACA 克隆后菌液可以保存几天还能测序?我的pcr产物胶回收后进行的TA克隆.最后用摇出来的菌液重新pcr觉得效果比较好.想拿菌液直接测序.我想知道菌液是四度短期保存么?保存多久之内可以不至于 PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别? 做基因多态性,PCR产物必须纯化后才能酶切吗我做人脂联素基因多态性,PCR产物后要用Hha Ⅰ做酶切,PCR产物一定要纯化后才能酶切吗?我看网上说要纯化,但打电话问大连宝工说可以不纯化直接酶 从转录组测序结果中得到一基因预测的CDS,pcr后测序获得orf的后半段,怎么得到前半段?转录组测序给的貌似是完整的orf,全长1600bp左右,在该orf的两端设计引物pcr,产物直接拿去测序,结果orf的后半 从克隆载体上PCR出目的基因原理 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引 为什么卡那霉素抗性基因大多用于植物转基因,动物转基因可以用它吗我做鱼生长激素克隆,要将cDNA的PCR产物转到大肠杆菌中保存,用卡那霉素筛选好还是利用Amp / IPTG/X2Gal平板上进行蓝白斑筛 PCR产物测序 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 在测序前如何进行pcr产物的酶切纯化,注意我想知道的是用于测序的pcr产物酶切纯化,不是用于克隆的酶切.