如何从真核生物总RNA中纯化mRNA?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 02:37:03
如何从真核生物总RNA中纯化mRNA?

如何从真核生物总RNA中纯化mRNA?
如何从真核生物总RNA中纯化mRNA?

如何从真核生物总RNA中纯化mRNA?
一、利用mRNA3‘末端含有多聚(A)+ 的特点,当分离的总RNA流经oligo(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液作用下,mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素上,然后逐渐降低盐浓度洗脱,在低盐溶液或蒸馏水中,mRNA被洗下.经过两次oligo(dT)纤维素柱,可得到较纯的mRNA.
二、磁性分离技术纯化mRNA1、原理：先将连有生物素的oligo(dT)引物与mRNA3’-端的polyA一起杂交,加入连有生物素结合蛋白的磁球,使杂交体与磁球结合,通过磁场作用,使连有杂交体的滋球与其他RNA分离；通过洗脱将连在磁球上的mRNA洗脱下来而得到纯化的mRNA.该方法简单、迅速、不易引起mRNA的降解.

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