作业帮HAT培养基筛选融合细胞的基本原理是有关细胞工程的!
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/10 11:30:46
HAT培养基筛选融合细胞的基本原理是有关细胞工程的!
HAT培养基筛选融合细胞的基本原理
是有关细胞工程的!
HAT培养基筛选融合细胞的基本原理是有关细胞工程的!
HAT系次黄嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶脱氧核苷（thymidin）三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基.对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径（de novo pathway）和中间合成途径（salvage pa-thway）.由于氨基蝶呤可阻碍起始合成途径,所以培养基中含有它时,细胞便只有中间合成途径,所以必须供给核苷酸.至于缺失中间合成途径的细胞,可失去增殖能力臻于死亡.根据这一点,不仅把混存于细胞群中的正常细胞,通过试管内培养进行选择,例如嘌呤的中间合成途径缺失株和嘧啶的中间合成途径缺失株,由于可以互补,所以两者的杂种细胞,即使在氨基蝶呤的存在条件下也可以增殖.在这种情况下,利用HAT培养基可对杂种细胞进行选择.次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷可作为中间合成途径的原料而进行添加.
单克隆抗体技术中也要选择有用的杂种细胞（即能产生抗体,又能无限传代）
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单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷细胞,在含有次黄嘌呤、氨基嘌呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长,而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活.用聚乙二醇诱导
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